三丁酸甘油酯作为脂类的一种，在代谢途径中起着重要的作用。脂肪酶活性最高，其次是甘油酯，尤其是2-单甘酯，在动物体内的脂质消化过程中，脂肪酶活性最弱。其中以单甘酯途径为主，以2-单甘酯为主要吸收途径，胰脂酶特异水解甘油三酯的1、3位酯键形成2-单甘酯和游离脂肪酸。单甘酯和2-单甘酯可以完全被肠上皮细胞吸收进入淋巴，部分进入血液，起到相应的作用。在颗粒体中存在一种酶，它能使单甘酯进一步酯进一步酯化为甘油三酯，该酶优先利用2-甘酯。

三丁酸甘油酯是一种典型的短链脂肪酸衍生物。由于动物口、胃内脂肪酶含量很低，且TB不易被胃酸分解，因此三丁酸甘油酯的消化吸收主要在肠道内进行，通过肠道内胰脂酶和后肠微生物的作用，逐步缓释分解为甘油、丁酸和极少量单丁酸甘油酯。

甘油通过细胞膜进入胞内，参与机体代谢，其吸收和转运主要有两条途径：一是为肠道细胞提供能量。肠内优先选用丁酸来提供能量，丁酸进入细胞后经β-氧化作用被分解成乙酰辅酶A，进入三羧酸循环为机体提供能量，或者在肝脏产生酮体，以供肝外组织供能。

甘油三酯的合成进入体内。在人体不再需要脂肪酸能量的情况下，再用丁酸、甘油和单丁酸甘油酯重新合成甘油三酯，储存在脂肪细胞中。